網(wǎng)織紅細(xì)胞是介于晚幼紅細(xì)胞和成熟紅細(xì)胞之間的不成熟紅細(xì)胞，通常較成熟紅細(xì)胞稍大，其胞質(zhì)中尚殘存部分嗜堿性物質(zhì)(RNA、核糖體)，經(jīng)堿性染料染色后可見深染的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，故名。

網(wǎng)織紅細(xì)胞計數(shù)是用作紅細(xì)胞產(chǎn)生或紅細(xì)胞生成的指標(biāo)，是診斷或監(jiān)測貧血治療最常用的臨床指標(biāo)。流式細(xì)胞術(shù)測量網(wǎng)織紅細(xì)胞不但大大提高了網(wǎng)織紅細(xì)胞計數(shù)的準(zhǔn)確性和精確性，還能提供一些反映網(wǎng)織紅細(xì)胞成熟度和大小的非傳統(tǒng)參數(shù)。臨床研究已經(jīng)開始將這些非傳統(tǒng)參數(shù)應(yīng)用于許多貧血性疾病的診斷和治療。

近年來，許多中、高端血細(xì)胞分析儀都配有自動的網(wǎng)織紅細(xì)胞分析功能。網(wǎng)織紅細(xì)胞的全自動血液分析過程消除了手工涂片、染色和不同技師引起的偏差，可使實驗更標(biāo)準(zhǔn)化。此外，同手工方法計數(shù)1000個細(xì)胞相比，自動的網(wǎng)織紅細(xì)胞分析法分析30000個細(xì)胞，大大提高了分析結(jié)果的準(zhǔn)確性。

1. 在流式通道中，運用VCS三維技術(shù)分析染色后的網(wǎng)織紅細(xì)胞：低頻波檢測細(xì)胞體積，網(wǎng)織紅細(xì)胞比成熟紅細(xì)胞稍大;高頻波檢測細(xì)胞的內(nèi)部成分，可剔除非紅細(xì)胞;激光散射將網(wǎng)織紅細(xì)胞與成熟紅細(xì)胞區(qū)分開來，因為網(wǎng)織紅細(xì)胞胞漿含嗜堿性物質(zhì)，結(jié)合染料后散射較多的激光，在散點圖上分布于紅細(xì)胞的右側(cè)，網(wǎng)織紅細(xì)胞成熟度越差,在散點圖上分布越靠右。

2.VCS技術(shù)

細(xì)胞經(jīng)染色和漂洗后，采用一種獨特的流式細(xì)胞術(shù)計數(shù)細(xì)胞，同時采用體積、傳導(dǎo)性和光散射三維分析來確定網(wǎng)織紅細(xì)胞。

體積檢測用于確定成熟紅細(xì)胞和網(wǎng)織紅細(xì)胞的大小。體積的信息對于區(qū)分網(wǎng)織紅細(xì)胞非常重要，根據(jù)定義，未成熟的紅細(xì)胞大于成熟的紅細(xì)胞。

傳導(dǎo)性或射頻測量提供細(xì)胞的內(nèi)部特性信息， 用于區(qū)分體積較小的白細(xì)胞。

3.散點圖和輪廓圖形分析

從體積、傳導(dǎo)性和光散射收集的原始資料反映在三維散點圖上。用曲線分離細(xì)胞群后，血小板和白細(xì)胞被區(qū)分，只留下成熟紅細(xì)胞和網(wǎng)織紅細(xì)胞作進一步分析。輪廓圖形分析以一種非線性的方式將網(wǎng)織紅細(xì)胞從成熟紅細(xì)胞中區(qū)分出來，這種非線性方式是沿著細(xì)胞群的曲線而不是直線。

4.網(wǎng)織紅細(xì)胞參數(shù)

血細(xì)胞分析系統(tǒng)中顯示的網(wǎng)織紅細(xì)胞參數(shù)是用作判斷儀器故障的工具，并有助于對散點圖進行解釋。

根據(jù)直方圖顯示的256通道中的體積，傳導(dǎo)性和光散射的分析，可以得到每個細(xì)胞群落的相關(guān)信息。平均通道值決定了每個細(xì)胞群落在散點圖中的實際位置。此外，通過計算得出的標(biāo)準(zhǔn)差決定了每個細(xì)胞群落每次檢測的差異程度。平均通道值和標(biāo)準(zhǔn)差都會受到儀器狀態(tài)、增益調(diào)節(jié)、試劑的影響，或者和某些特定的病人樣本相關(guān)。

5.網(wǎng)織紅細(xì)胞報警

利用復(fù)雜的演算，定位參數(shù)結(jié)合其他細(xì)胞群的統(tǒng)計保證結(jié)果的完整性并同時給出網(wǎng)織紅細(xì)胞報警信息。某些臨床疾病會導(dǎo)致散點圖與已知的成熟紅細(xì)胞和網(wǎng)織紅細(xì)胞群不相符。這些不典型的細(xì)胞群產(chǎn)生的確認(rèn)網(wǎng)織紅細(xì)胞或異常網(wǎng)織紅細(xì)胞信息以此來提示實驗室需要進行進一步復(fù)查。

網(wǎng)織紅細(xì)胞報警信息

6.輪廓圖形分析技術(shù)過程

可觀察到一個有高光散射的細(xì)胞群落，它們的體積均值比網(wǎng)織紅細(xì)胞更接近于成熟紅細(xì)胞。這群細(xì)胞所具有的高光散射的特性與地中海貧血中常見的未完全溶血(影細(xì)胞)的紅細(xì)胞一致。這個細(xì)胞群可能會因為疾病的異源性和病人的狀況不同變得不明顯或非常顯著。

鐮狀細(xì)胞標(biāo)本中紅細(xì)胞的形狀和大小多樣，其網(wǎng)織紅細(xì)胞和成熟紅細(xì)胞的體積均值和標(biāo)準(zhǔn)差均會升高。這個細(xì)胞群可能會因為疾病的異源性和病人的狀況不同變得不明顯或非常顯著。

正常 鐮形紅細(xì)胞 小體積細(xì)胞

正常和異常網(wǎng)織紅細(xì)胞散點圖

在散點圖中，可觀察到一個大體積的細(xì)胞顆粒群，它們的光散射均值比網(wǎng)織紅細(xì)胞更接近白細(xì)胞。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)這群細(xì)胞是小體積白細(xì)胞群延續(xù)出的一部分，可能是碎片或破碎的白細(xì)胞。

7.網(wǎng)織紅細(xì)胞的相關(guān)參數(shù)

貝克曼庫爾特通過自動的網(wǎng)織紅細(xì)胞分析和流式細(xì)胞術(shù)測量光散射為網(wǎng)織紅細(xì)胞群提供了更多的細(xì)節(jié)。網(wǎng)織紅細(xì)胞群可進一步被分成10個成熟度。含有最多RNA的網(wǎng)織紅細(xì)胞位于最強光散射區(qū)，3到10區(qū)。

此外，VCS技術(shù)測量網(wǎng)織紅細(xì)胞還可得出以下參數(shù)：網(wǎng)織紅細(xì)胞百分比(RET%)和網(wǎng)織紅細(xì)胞絕對值(RET#)，未成熟網(wǎng)織紅細(xì)胞指數(shù)(Immature Reticulocyte Fraction, IRF)，平均網(wǎng)織紅細(xì)胞體積( Mean Reticulocyte Volume, MRV)，平均球形細(xì)胞體積(Mean Sphered Cell Volume, MSCV)，和高光散射網(wǎng)織紅細(xì)胞參數(shù)(High Light Scatter Reticulocyte, HLR% & HLR#)。

8. 未成熟網(wǎng)織紅細(xì)胞指數(shù) (IRF)

定義為幼稚的或未成熟的網(wǎng)織紅細(xì)胞與總的網(wǎng)織紅細(xì)胞的比值。未成熟的網(wǎng)織紅細(xì)胞較大，按照光散射分類就是那些有最強光散射特性，即最多RNA的網(wǎng)織紅細(xì)胞。

9. IRF的臨床應(yīng)用

正常情況下IRF占網(wǎng)織紅細(xì)胞總數(shù)的不足5%。未成熟網(wǎng)織紅細(xì)胞在大量的促紅細(xì)胞生成素的刺激下會釋放到外周血中，如出血，某些貧血或?qū)Υ碳す撬柙煅委煹姆磻?yīng)。IRF類似于中性粒細(xì)胞的核左移，能夠提供額外的紅細(xì)胞信息，這些信息可以縮短疾病從診斷到治療或單純的治療時間。

大量文獻已表明，IRF結(jié)合網(wǎng)織紅細(xì)胞計數(shù)可提高貧血分類，監(jiān)測骨髓恢復(fù)及貧血治療情況。

近年來先進的技術(shù)為臨床醫(yī)生提供了更精確的網(wǎng)織紅細(xì)胞計數(shù)和更有價值的新的網(wǎng)織紅細(xì)胞參數(shù)。最有前景的一個新參數(shù)是未成熟網(wǎng)織紅細(xì)胞指數(shù)，它在指導(dǎo)臨床實踐方面具有實用的臨床意義。此外，MSCV和MCV的相關(guān)性在提示遺傳性球形紅細(xì)胞增多癥方面有重要的意義。